　　我想有个我们的大房子，我们在里面快快乐乐的生活，相亲相爱一辈子...下辈子也要一起，还要养一只狗狗！

我知道房子会有的，狗狗也会有的。

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[技术篇]SP法和SABC法都是亲合组织化学技术(三步法)。

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幸福的小孩发表于 2006/9/20 17:21:03

ABC法：ABC代表的是亲和素－生物素－过氧化物酶复合物。利用抗生物素分别连接生物素标记的第二抗和生物素标记的酶。但是此法注意内源性生物素活性的消除，以减少非特异性的染色。SP法：是采用生物素标记的第二抗体与链霉菌抗生物素蛋白连接的碱性磷酸酶及底物色素混合液来测定细胞或组织中的抗原。PA是一种金黄色葡萄球菌细胞壁分离的蛋白质，它能与各种动物的IGG的FC段结合，在免疫组化中可作为桥抗体或标记抗体。最大的优点是不受种属的特异性限制。此法还具有染色时间短、灵敏度高、背景染色淡等优点，分子量小，易于穿透组织。两者本质的区别是：SABC法的“三抗”是SABC复合物即链酶亲和素－生物素－过氧化物酶复合物；而SP法的“三抗”是过氧化物酶直接与链酶亲和素相连的，没有通过生物素的中介连接。SABC步骤：切片常规脱蜡、脱水；30％H2O2＋蒸馏水10份混合，室温5－10分钟以灭活内源性酶，蒸馏水洗；将切片浸入0.01M枸橼酸盐（PH6.0），微波炉加热至沸腾后断电，间隔10分钟，反复两次进行热修复抗原；滴加5％BSA封闭液，室温20分钟；滴加一抗，37℃1小时30分钟孵育；滴加生物素化山羊抗小鼠IgG，室温下20分钟，PBS（PH7.2－7.6）洗；滴加试剂SABC，室温下20分钟，PBS洗5分钟×4次；DAB显色：取1ml蒸馏水，加试剂盒中A，B，C试剂各1滴，混匀后加至切片，室温显色18分钟；苏木素轻度复染；脱水，透明封片。显微镜下观察。

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sfdsf(游客)发表评论于2009/5/18 10:47:11

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000(游客)发表评论于2007/1/21 17:14:07

那同一个因子用sp与sabc法染出结果会有差别吗，或者说同一个因子别人用sp我用了sabc法,操作正确的情况下,是否也应该得出相同的结果

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